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武 汉 大 学 2001 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、解释概念 (20 分,每个4分) 1. Satellite DNA-卫星 DNA,又称串联重复序列,由2~6个核苷酸组成的重复单位组成的串联重复。 2. Replisome-复制体,是指由多种复制相关蛋白组成的复合物。 3.逆转座子,指另一类能够通过逆转酶和整合酶共同作用介导转座的转座子 4. 反式激活因子,一类能结合到顺式作用元件上形式激活作用的蛋白质 5. 衰减子,原核生物操纵子上一段能够显著减弱或终止转录作用的核苷酸序列 衰减作用,指原核生物中根据底物浓度变化来调控基因转录进程的中断与否的一种调控机制。 三、问答题(50 分) 1.说出双链 DNA 复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15 分) 2.简述增强子的特点和性质及作用机制。(10 分) 3.简述真核 RNA 聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始 (15 分) 4.DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠 杆菌i)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII 等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA段克隆到 pUC 质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10 分) 武 汉 大 学 2002 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 三、问答: 1、简述(或绘图说明)真核细胞 RNA 聚合酶 II 转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15 分) 2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分) 3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分) 4、你正在进行 Southern blot 分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH 溶液中使 DNA 变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把 DNA 从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分) 武 汉 大 学 2003 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、名词翻译,并简要解释(共10小题,每题4分,共40分) 1. Domains and motifs 结构域和结构基序,分别指的是反式作用因子中与蛋白质和DNA分子相互作用的两种蛋白质亚基。 2. Alternative splicing 选择性剪接,指一个基因在不同发育阶段、分化细胞或生理状态下,通过不同的剪接方式,来产生多个不同mRNA的过程。 3. Reporter genes 报告基因,指的是一类表达产物容易被检测或观察到的基因。 4. The PCR cycle PCR循环,完成一次PCR中变性-退火-延伸的过程为一次循环。 5. Restriction mapping 限制性酶切作图,一种利用限制酶切位点标定DNA分子相对位置的方法。 6. Multiple cloning sites 多克隆位点,指的是DNA中含有两个以上密集的能被多种限制酶识别并切割的位点。 7. DNA libraries DNA文库,是指某种生物的基因组DNA切割成适宜大小,与载体连接后导入宿主细胞进行克隆后所获得重组体内基因组片段的集合。 8. Proteomics 蛋白质组学,指的是一门在蛋白质组水平上研究蛋白质特征,包括表达、修饰、互作等,从而进一步了解基因功能的学科。 9. Replicon 复制子,指的是细胞中能独立复制的一个DNA单元。 10. Semi-conservative replication 半保留复制,指DNA复制中,每条单链分别作为模板合成新链,从而在每条子代DNA中保留一条亲代DNA链的过程。 二、简答题 (共 5 题,每题 8 分,共 40 分) 1.请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。 2.简述 DNA 损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。 3.简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymous codon)及其在生物学上的重要性。 4.简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。 5.简述 cDNA 文库的构建过程。 三、论述题 (共5题,1-4 题每题15分,第5题10分,共70分) 1.人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么? 2.什么是操纵子(operon)?试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。 3.请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的相互作用方式。 4.试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及 DNA 的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面? 5.限制性核酸内切酶有哪几种类型 ?哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么?请简要说明其理由? 武 汉 大 学 2004年攻读硕士研究生入学考试试题 一,名词翻译与解释(共10小题,每题4分,共40分) 1. Synonymous codons 同义密码子,指能编译同一种氨基酸的密码子。 2. RNA editing RNA编辑,一种通过改变碱基或插入核苷酸来对遗传信息进行修改的转录后加工方式。 3. Spliceosome 剪切体,指的是有多种snRNP组成的介导mRNA前体中内含子剪切的蛋白核酸复合物。 4. Microarray 微阵列,一种通过将基因组核酸固定在固相介质上,利用核酸杂交,结合电脑检测分析来高效检测基因表达的技术。 5. Plaque hybridization 噬菌斑杂交,指的是将噬菌斑拓印在硝酸纤维膜上变性处理后通过核酸杂交,来筛选含有特定基因的噬菌斑的方法。 6. Open reading frame 开放式阅读框,指基因组中一段连续的可编码一条整多肽的核苷酸序列。 7. Ribozyme 核酶,一种具有催化活性的RNA,能通过催化靶位RNA链中磷酸二酯键的断裂来特异性剪切底物分子。 8. RFLP 限制性片段长度多态性,指从不同个体制备的DNA经过同一种限制酶切割后产生不同长度DNA片段的现象。 9. Site specific recombination 位点特异性重组,指的是基因组中在重组酶作用下发生于具有特异性重组位点间的基因重排现象。 10.RNA interference RNA干扰,是指在进化过程中高度保守的,由双链RNA诱发的同源mRNA高效特异性降解的现象。 二,简答题(共5小题,每小题10 分,共50分) 简述真核生物rRNA 基因,tRNA 基因和 mRNA 基因的转录机制。 原核生物和真核生物中存在哪些类型的转座子?其转座机制有那些? 3.简述真核生物DNA复制中,端粒复制与染色体其他部分DNA复制的异同和生物学意义。 4.原核生物的蛋白质合成可分为哪些阶段?简述各阶段的主要事件。 5.列举4种可用来检测,鉴定转基因动,植物的分子生物学技术和方法,简述选择这些技术的理由。 三,论述题(共4题,每题15分,共60分) 1.试述环境因素对 DNA 的损伤以及生物体中存在的 DNA 损伤修复系统。如果DNA 损伤没有被修复会造成什么后果? 2.试比较真核生物 RNA 聚合酶Ⅱ识别的启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点,各结构单元的功能是什么?为什么原核生物一种 RNA 聚合酶能识别不同的结构基因? 3.在进行基因工程时,载体是携带靶DNA段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具,请问一个载体应具有哪些基本特性和结构特点? 4.人类基因组计划基本完成表明:人类基因组约有3乘10的9次方bp(而大肠杆菌的基因组约为4。6 乘10的6次方bp),其中仅有百分之一的基因组 DNA 直接编码蛋白质,约有百分之二十四的基因组 DNA 为内含子,而百分七十五的基因组 DNA 为其他非编码序列。试从(1)传代中遗传信息的保持;(2)基因表达调空的角度来论述人类基因组如此排列的可能生物学意义。 武 汉 大 学 2005 年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷 一、名解(共10小题,每题4分,共40分) 1. Ubiquitin 泛素,一种高度保守的由76个氨基酸构成的,可作用于介导蛋白质降解的蛋白质。 2. Ribosomal binding site 核糖体结合位点,指mRNA上一段可引导核糖体与mRNA结合的核苷酸序列。 3. siRNA 小干扰RNA,一种可由RNA依赖性RNA聚合酶扩增并经过Dicer切割形成的可介导同源mRNA降解或翻译抑制的小双链RNA。 miRNA 微RNA,一种由基因编码产生,可作用于同源mRNA降解或翻译抑制的单链小RNA。 4. Proteome 蛋白质组,指的是由一个基因组编码产生的所有蛋白质。 5. DNA foot printing DNA足迹,指的是一种利用蛋白质结合DNA可使结合部位不受DNase降解的特点来检测蛋白质结合位点的方法。 6. Single nucleotide polymorphism 单核苷酸多态性,主要指的是在基因组水平上由单个核苷酸变异而引起的DNA序列多样性的现象。 7. Chromosome walking 染色体步移,指通过连续将上一个已知克隆的末端序列作为引物来从文库中分离下一个克隆序列,从而获取已知克隆序列的旁侧序列的方法。 8. Haplotype 单倍型,指的是位于一条染色体上或某一区域内的一组相关联的SNP位点。 9. Zoo blot 动物园印迹(种间印迹)即用southern blot 来检测某一种属的DNA探针与多个种属基因组的DNA杂交活性,从而评估种间关系一段DNA序列在进化过程中的的保守程度。 10. Transcription unit 转录单位,指一段能够被RNA聚合酶转录成一条连续酶mRNA的DNA序列。 二、简答(共5小题,每题10分,共50分) 1.简述真核细胞rRNA tRNA和mRNA 转录使用的聚合酶及各RNA 前体(precursor)加工的基本过程? 2.研究表明蛋白质组比基因组更复杂,蛋白质组中存在的蛋白质数目比基因组中存在的基因数目要多许多,这是如何造成的,你如何解释这种现象? 3.简述原核与真核细胞染色体结构的差别? 4.在分子生物学研究中经常用各种载体进行研究工作,试问有哪些不同大小类型的载体,各自的主要特点是什么? 5.简述DNA损伤修复的机制,在什么情况下DNA损伤会引起DNA突变? 三、论述题(共4题,每题15分,共60分) 1.蛋白质与核酸的相互作用存在于基因表达的各个水平上,请分别举例说明在基因复制RNA转录和蛋白质翻译过程中二者的相互作用? 2.一个真核细胞的蛋白质编码基因有哪些结构元件(或组建)组成(包括各种调控元件)?请画图表示,并说名各元件的功能与作用? 3.请设计一组试验来(1)克隆一个你所感兴趣的人类基因(2)并对基因产物大量表达与纯化(3)然后研究该基因的生物学功能? 4.生命科学的研究已进入后基因组时代,试从“分子生物学”的角度来 谈谈你对后基因组时代的认识,并预测后基因组时代里“分子生物学”发展的未来 ? ‘’ 武 汉 大 学 2006 年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷 一、名解(共10小题,每题4分,共40分) 1、DNA Microarray DNA微阵列,一种将核酸固定在固相载体上,然后通过核酸杂交、电脑分析检测来高效检测基因组表达情况的技术。 2、Spliceosome 剪接体,由多种snRNP组成的用于介导mRNA前体内含子剪切的蛋白质-核酸复合物。 3、Cosmid vector 黏粒载体,一种利用?噬菌体COS序列和质粒DNA构建的基因工程载体。 4、Proteasome 蛋白质组,指的是由一个基因组表达的所有的蛋白质。 5、
更多精彩尽在这里,详情点击:https://oaktreestamps.com/,科森扎队Zinc finger domain 锌指结构域,指反式作用因子中需要有锌离子参与下才具有DNA结合活性的蛋白质亚基。 6、DNase I hypersensitivity I型脱氧核糖核苷酸酶敏感位点,指在用DNase处理时,切割作用优先集中作用的特俗位点。 7、Insulator 绝缘子,一种能够阻止其临近增强子或沉默子对其界定的基因启动子发挥调控作用的调控序列。 8、Post-transcriptional gene silencing 转录后基因沉默,指由RNAi等因素作用下法发生于基因转录后水平的基因表达被阻断的现象。 9、Reverse transcription PCR 逆转录PCR,指以mRNA为模板,利用热稳定性逆转录酶合成cDNA并将其扩增的PCR技术。 10、Missense mutation 错义突变,指的是由于碱基的改变引起对应密码子氨基酸决定性发生改变从而使最终蛋白质的活性跟着产生变化的突变类型。 二、简答题 (共5小题,每题10分,共50分) 1、简述microRNA 的基因调控功能与机制。 2、简述染色体端粒复制的问题,人正常细胞和癌细胞的端粒复制有何不同? 3、真核生物基因组中含有几种类型的DNA序列?你如何设计实验来证明? 4、简述RNA编辑(RNA editing)的机制及其对基因表达的影响。 5、下面的DNA序列中含有一个假象基因,编码仅5个氨基酸。请写出这些氨基酸的密码子以及终止密码子,并指出RNA转录的模版是哪条链?启动子在该序列左侧还是右侧? 5-TCATGCTAGACACGTAATAGCATATGGGA-3 3-AGTACGATCTGTGCATTATCGTATACCCT-5 三、论述题(共4题,每题15分,共60分) 1、论述一个真核基因产生有功能的蛋白质需要经过哪些分子生物学工程(event)?列出每个过程发生的细胞位置和参与的主要酶和蛋白因子。 2、有哪几种类型的遗传重组?其重组的特点如何? 3、DNA的甲基化在遗传信息的传递、DNA 复制和 DNA 损伤修复等过程中有什么重要意义?请举例说明。 4、假如你进入实验室开始研究一个小鼠 DNA 结合蛋白的生物学功能: (1)、请设计实验确定其编码基因在小鼠细胞内的表达水平? (2)、请设计实验确定该蛋白的那个结构域具有 DNA 结合功能? (3)、如何确定该蛋白在小鼠体内(invivo)的生物学功能? 武 汉 大 学 2007年攻读硕士学位研究生分子生物学入学考试 一、名词翻译与解释(共10小题,每小题4分,共40分) 1、Transcriptome 转录组,指由一个基因组转录产生的全部转录产物。 2、Translesion replication 跨损伤复制,指的是DNA在复制过程中越过损伤位点继续完成复制的现象。 3、Riboswitch 核糖开关,指原核生物转录产物上一段可通过对小分子物质浓度的变化进行应答从而调控基因表达的调控序列。 4、Synonymous mutation 同义突变,指突变造成的核苷酸改变并未是其所在密码子的氨基酸决定性发生改变的现象。 5、Tandem gene cluster 串联基因簇,指有多个基因串联排列而成的大串的重复单位。 6、Frameshift 移码,指由于核苷酸的插入或缺失造成的DNA序列发生改变的现象。 7、Nucleosome positioning 核小体定位,指DNA双螺旋相对组蛋白八连体的位置。 8、Non-autonomous transposon 非自主型转座子,一类不带转座酶基因,需要在自主型转座子存在下才能完成转座的转座子。 9、Holliday junction 霍利迪连接体,即重组时两个DNA双链以四股DNA在连接点交换配对时在电镜下可观察到的十字结构。 10、Polymerase switching 聚合酶转换,指真核DNA复制过程中聚合酶α完成引物合成后被延伸性强的?、δ聚合酶取代的现象。 二、简答题(共5小题 ,每小题10分,共50分) 1、试从DNA和RNA结构的不同解释为什么DNA被广泛作为遗传信息的承载者?RNA在细胞内行使哪些功能? 2、什么是蛋白质组?什么是蛋白质组学?如何理解高等生物细胞中一个基因组可以产生多少个蛋白质组? 3、什么是解旋酶(helicase)?请设计实验并画设计图证明一个DNA解旋酶是具有 3’→5’还是 5’→3’解旋活性? 4、论述原核生物基因表达调控的主要策略,并举例进行详细说明? 5、核糖体是蛋白质合成的主要机器。请问原核生物有哪些亚基和分子组成?核糖体在蛋白质翻译过程中有哪些功能位点?起什么作用? 三、论述题(共4小题,每题15分,共60分) 1、在真核生物中,成熟的 mRNA 序列往往与基因组 DNA 序列之间 存在许多差异,有些序列甚至在基因组DNA上根本没有相应的互补序列。另外,同一种基因的DNA常常会转录出多种mRNA。请解释并说明产生这些现象的机制及其意义。 2、真核细胞 mRNA 的Ⅱ型RNA聚合酶转录,需要Ⅱ型启动子和转录因子TFⅡA ,TFⅡB ,TFⅡD ,TFⅡE和TFⅡH等。(1)请设计实验证明这些转录因子和RNA聚合酶Ⅱ结合到启动子的顺序;(2)请设计实验证明TFⅡD复合体可以单独准确结合到启动子TATA box上;(3)TFⅡD复合体包括哪些蛋白质?如果你有其中一个蛋白质的抗体,并知道其他几个蛋白质的大小 ,请设计实验验证TFⅡD复合体的组分。 3、DNA复制具有很高的准确性(accuracy)或保真度(fidelity), 出错率低于1010分之一。请解释: (1)DNA 复制过程中和复制后有哪些机制保证复制的准确性? (2)为什么RNA聚合酶的保真度比DNA复制低? (3)DNA复制的错误或突变对生物本身有何意义? 4、两位美国科学家 Fire 博士和 Mello 博士在分子生物学研究领域做 出了重大贡献,并因此获得了2006年度的诺贝尔生理与医学奖。试论述其获奖成果中发现的重要分子生物学机制以及对分子生物学研究的重要影响? 武 汉 大 学 2008 年攻读硕士学位研究生分子生物学入学考试试题 一、名词翻译与解释(共10小题,每小题4分,共40分) 1. Missence mutation 错义突变,指由于结构基因中某个核苷酸的改变使决定一种氨基酸的密码子变成决定另一种氨基密码子的现象。 2. Polysome 多聚核糖体,指的是在同一mRNA上进行翻译的多个核糖体形成的念珠状结构。 3. Non-Watson-Crick base pairing 非沃森-克里克碱基配对,指的是RNA上出现的不同于A-T,C-G配对的碱基配对方式。 4. Tandem mass spectrometry 5. Shine-Dalgarno sequence SD序列,指的是原核mRNA上位于起始密码上游一段能与核糖体16SrRNA互补配对的序列。 6. tmRNA 一种tRNA和mRNA的嵌合体,用于在翻译发生错误时解除核糖体与mRNA结合的特殊RNA。 7. Allostery activation 变构效应激活,指激活因子通过触发RNA聚合酶或DNA构象改变从而激活转录的现象。 8. Blue-white screening 蓝白斑筛选,指利用携带半乳糖苷酶α段重组质粒转化对应缺陷型大肠杆菌,产生β-半乳糖苷酶可将无色化合物X-gal切割出深蓝色的物质,使菌落产生颜色变化,从而根据颜色变化鉴定和筛选重组子的方法 9. Attenuator 弱化子,指原核生物操纵子中一段能根据底物浓度变化减弱或终止转录进程的调控序列。 10.Group I intron I型内含子,一种可自我形成索套结构切除内含子的RNA 二、简答题(共5小题 ,每小题10分,共50分) 1、请描述两个经典实验证明遗传物质是DNA而不是蛋白质。 2、翻译过程中需要哪四种组分?它们的功能是什么? 3、在遗传物质复制、转录和翻译过程中如何确保其准确性? 4、真核细胞转录和加工中哪些过程是相偶联的?它们是如何偶联的? 5、酵母双杂交技术是利用其什么特点建立起来的?在科学研究中有什么作用? 三、论述题(共4小题 ,每题15分,共60分) 1、在真核生物转录中,有哪三种序列构成核心启动子?请说明Ⅱ型启 动子中有哪些因子构成起始复合替,除了这些还有哪些是构成复合体 所必须的?它们各有什么功能? 2、人的基因组大概有2.5-3万个基因,但它们构成的生物体蛋白质种类却有 20 多万种。人的基因组是怎样以有限的基因形成如此多的蛋白质的? 3、有一研究生想使他所感兴趣的一大肠杆菌的基因严格受碳源控制,在葡萄糖供应时,该基因不表达,当供应乳糖时,该基因大量表达?你如何帮助他实现这种想法?依据是什么? 4、miRNA 在癌细胞中有的高水平表达,有的低水平表达。请解释什么是miRNA?并推测上面两种类型的miRNA 各有什么生物学功能? 有一种miRNA-21在癌细 胞中高水平表达,请设计实验得到该miRNA的生物学功能。 武 汉 大 学 2009年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、名词翻译与解释(共 10小题,每小题4分,共40分) 1、Regulatory gene 调节基因,一类编码基因调控蛋白的基因。 2、Real-time PCR 实时PCR,是在PCR扩增过程中通过荧光信号对PCR进程进行实时监测的方法。 3、Nick translation 切口平移,是指通过切口产生3‘-OH和5’-P,DNA延伸合成3‘端而5’端则被小片段降解,从而使切口位点沿双链向3‘端移动,是一种在体外向DNA分子引入放射标记的技术。 4、Generic promoter 通用启动子 5、Histone code 组蛋白密码,一个或多个组蛋白尾巴的不同共价修饰依次发挥作用或组合在一起形成一个修饰级联,这些修饰在时间空间上的组合即为组蛋白密码。 6、Proteomics 蛋白质组学,指在蛋白质组水平上研究蛋白质的结构特征,也包括表达、修饰、互作等,从而进一步了解基因功能的一门学科。 7、Gene targeting 基因打靶,是一种利用同源重组方法定向改变生物体某一内源基因的遗传学技术 8、Single nucleotide polymorphism 单核苷酸多态性,指由于基因组上单个核酸的突变所造的DNA序列产生多样性的现象。 9、Alternative mRNA processing mRNA选择性加工,指转录后根据生长发育的需要通过不同剪接方式是一种基因产生多个不同mRNA的过程。 10、Replicon 复制子,指能够单独复制的一个DNA单元。 二、简答题(共5小题,每小题10分,共50分) 1、什么是DNA损伤?生物体DNA损伤与哪些因素有关?生物细胞有哪些机制来处理DNA损伤,并进行DNA损伤修复? 2、表观遗传修饰包括哪些内容?并举一例说明其在基因的表达调控和染色体重塑等方面有哪些作用? 3、反式作用因子是直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件系列上而参与调控靶基因转录效率的蛋白质,试问反式作用因子的 DNA 结合结构域有哪几种类型?特点如何? 4、PCR的原理是什么?在PCR反应中是否循环次数越多,所合成产物的数量也越多?为什么? 5、增强子和绝缘子在基因表达调控中的作用和特点有哪些? 三、论述题(共4小题 ,每题15分,共60分) 1、试论述转座子的类别、结构和转座机制及在基因表达与分子进化中的作用。 2、在进行遗传重组和基因克隆与表达的研究中,对分子克隆的载体与宿主系统的选择有非常重要的作用。请论述主要载体系统的特点及其宿主系统。 3、从转录后水平上进行比较,论述原核生物和真核生物 RNA 加工的异同点。 4、什么是 HapMap 计划,ENCODE 计划,Jim 计划,Proteome 计划?这些计划于人类基因组计划有 何联系?这些计划对分子生物学的发展和揭示生命活动的分子机制有什么影响和意义? 武 汉 大 学 2010年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、名词翻译与解释(共10小题 ,每小题4分,共40分) 1、epigenetic change 表观遗传改变,是指基因表达发生改变但不涉及DNA序列变化且能够发生遗传的现象。 2、peptide mass fingerprinting 肽指纹图谱,是一种在蛋白质组中通过生物质谱对酶解后的蛋白质进行质量分析,从而对蛋白质进行鉴定的方法。 3、RNA Splicing RNA剪接,指真核细胞中基因转录后切除RNA前体中内含子,连接外显子的过程。 4、Housekeeping gene 管家基因,一类在所有细胞中均表达,且其表达产物是维持生命活动所必需的基因。 5、frame shift mutation 移码突变,一种因碱基缺失或插入所导致的DNA序列发生移位错误改变的基因突变。 6、DNA-binding domain DNA结合域,能与DNA相互作用的蛋白质上用于结合DNA的蛋白质亚基。 7、Shine-Dalagrno Sequence SD序列,原核生物mRNA上一段能与核糖体16SrRNA特异性互补配对,从而引导核糖体与mRNA结合的序列。 8、gel retardation 凝胶阻滞,一种利用DNA与蛋白结合后会降低其在凝胶电泳中迁移率的特点而设计的用于验证DNA与蛋白质互作的实验。 9、chromatin immunoprecipitation 染色质免疫沉淀,一种利用抗体做标记来检测细胞内蛋白质与DNA相互作用的方法。 10、Rho-dependent termination Rho依赖性转录终止,指原核生物转录过程中一种需要依赖Rho因子辅助才能完成转录终止的现象。 二、简答题(共5小题 ,每小题10分,共50分) 1、什么是CpG岛?一段高度甲基化的CpG岛说明什么? 2、说出5种RNA的名称,以及他们的功能。 3、简述原核和真核细胞中DNA复制的差异。 4、突变有哪几种类型?分别导致了什么样的后果? 5、什么事增强子?有哪些特点? 三、论述题(共4小题,每题15分,共60分) 1、试论述乳糖操纵子的调控机制。 2、设计实验建立题中给定的一种植物的cDNA文库。 3、2009年诺贝尔生理学奖的内容,以及其对于分子生物学的意义,并用其中的机制解释克隆多利羊寿命短的原因。 武 汉 大 学 2011年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、科学名词解释及翻译 (共10小题 ,每小题4分,共40分) 1. Chromatin remodeling 染色质重塑,指基因复制、表达等过程中,染色质的包装状态、核小体中组蛋白以及对应DNA分子相对结构位置改变的现象。 2. Internal ribosome entry site 内核糖体进入位点,一段能够是蛋白质翻译不依赖于5帽结构,从而直接进入mRNA中间起始翻译的核酸序列。 3. Alternative splicing 选择性剪接,一种基于生长发育需要,通过不同的剪接方式使一种基因产生多种不同mRNA的RNA加工机制。 4. Non-autonomous transposon 非自主型转座子,一种缺乏转座酶基因无法自发完成的转座过程的转座子。 5. Shine-Dalgarno sequence SD序列,原生生物mRNA上一段能与核糖体16SrRNA互补配对从而引导核糖体与mRNA结合的序列。 6. Real-time PCR 实时PCR,一种在PCR扩增过程中利用荧光信号对扩增过程DNA数量变化进行实时监测的技术。 7. Ribozyme 核酶,一种具有催化活性的RNA,能够通过催化靶RNA链上磷酸二酯键断裂从而特异性切割底物RNA分子。 8. SOS response 应急反应,指染色体DNA突然出现大量损伤时细胞做出的启动大量基因对损伤进行修复的应激反应。 9. Telomerase 端粒酶,一种在真核生物中用于染色体复制时用于催化合成端粒来解决末端肤质问题的酶。 10.Suppressor mutation 抑制基因突变,指第一次突变产生性状可有第二次突变而恢复原有性状的现象。 二、简答题(共5小题 ,每小题10分,共50分) 1. 简述色氨酸操纵子的调控机制。 DNA 在复制过程中如何保持准确性? 分别阐述克隆载体和表达载体(各 5 种)及其特点和用途。 4. 什么是 RNA editing?它的机制是什么? 5. 什么是染色体步移?它的作用是什么? 三、论述题 (共4小题,每题15分,共60分) 1.真核生物转录调控因子的类型和特点?阐述根据一种转录调控因子的特点建立的分子生物学技术的及其应用。 2.真核生物和原核生物的基因组的特点及差异?已知某基因的cDNA(长14Kb),如何用实验 证明该生物基因还有内含子?如何确定内含子在全长中的比例?如何用实验确定某未知基因的功能? 3.每种基因a 是诱导表达基因,在分子B(小分子化合物)的作用下可以诱导表达。已知该基因的序列,该基因上启动子的序列。已知某调控元件的序列为 ACGTCG,基因c表达的蛋白C可以结合在该调控元件上,试用三种证明该调控元件可以诱导基因a表达。 武汉大学 2012年攻读硕士学位研究生分子生物学入学考试试题(科目代码:653) 专业术语翻译与解释(共8题,每题5分,共40分) Base flipping 碱基翻出,指单个碱基重双螺旋中突出的现象。 RNase P 核糖核酸酶P,一种含有RNA分子的核糖核蛋白,可作用于催化切割RNA。 Histone chaperones 组蛋白分子伴侣,一类不依赖ATP来介导组蛋白和DNA分子相互作用的,并在反应后不存留与核小体的蛋白质。 Paracodon 复密码子,指tRNA上决定其携带氨基酸种类的结构区域。 Trans-splicing 反式剪接,将来自不同基因的mRNA前体剪接形成成熟mRNA的一种剪接方式。 Sliding clamp 滑动夹,一种在RNA聚合酶转录延伸是提高其延生能力的蛋白质。 Viral-like retrotransposon 类病毒逆转录转座子,一种具有与类病毒类似的长末端重复序列、整合酶/转座酶基因的转座子。 Initial transcribing complex 转录起始复合物,一种由RNA聚合酶和转录因子组成的用于起始转录的复合物。 简答题(共5题,每小题10分,共50分) 简述保证tRNA 和mRNA 正确配对的三种机制。 简述DNA复制中RNA引物的去除所需要的酶及其作用。 简述核糖开关的结构及其作用机制。 简述真核生物抑制子的作用方式。 简述细菌RNA聚合酶的校正机制。 论述题(共3题,每题20分,共60分) 从分子水平和感染条件解释?噬菌体溶源性生长途径的建立过程。 从你感兴趣的课题研究中,你发现真核生物的A蛋白可以上调B蛋白的表达,对此你很感兴趣,请详细描述你将通过哪些实验进行下一步研究。 阻遏作用一般只能是转录效率降低70倍,为什么在色氨酸高浓度和低浓度下可以观察发现大肠杆菌色氨酸操纵子的表达水平相差约600倍? 武汉大学 2013年攻读硕士研究生入学考试试题 一、名词解释(共10小题,每题4分,共40分) 1. Ribozyme 核酶,一种具有催化活性的RNA,可通过催化靶RNA链上的磷酸二酯键发生断裂,来特异性剪切RNA分子。 2. Missense Mutation 错义突变,指由于碱基发生替换使其所在密码子的氨基酸决定性发生改变,从而使最终蛋白质活性发生变化的一种基因突变。 3. Insulator 绝缘子,是指在基因组内建立独立的转录活性结构域的边界DNA序列,能阻隔临近增强子或沉默子对其所界定的基因启动发挥调控作用。 4. RNA trans-splicing RNA反式剪接,是指将来自不同基因的mRNA前体剪接形成成熟mRNA的一种剪接方式。 5. Nucleotide excision repair 核苷酸切除修复,指在一系列切除修复蛋白作用下,将包括损伤位点在内的一段序列一并切除,后再由DNA聚合酶和连接酶对缺口填补的修复机制。 6. Transposon 转座子,在染色体或质粒上一类能自行改变自身位置的DNA序列。 7. Dam methylase Dam甲基化酶,大肠杆菌中由Dam基因编码的,能将其识别序列GACT中的腺嘌呤甲基化的酶。 8. Spliceosome 剪接体,一种由多种核小核糖核蛋白组成的用于内含子切除的复合物。 9. Core promoter 核心启动子,指RNA聚合起始转录所必需的最少的DNA序列。 10. SNP 单核苷酸多态性,指基因组上由于单个碱基的变异所造成的DNA序列产生多样性的现象。 二、简答题(共5小题,每题10分,共50分) 1.线’帽子结构有何生物学功能?其缺失会造成什么后果? 2.某一基因开放阅读框中的一个碱基突变会对该基因编码产物产生什么影响? 3.请简述真核生物的mRNA和原核生物的mRNA有何不同。 4、请简述Ⅰ型内含子剪切的过程. 5.请简述Western blot 的原理和步骤。 三、论述题(共3小题,每题20分,共60分) 1.研究基因功能通常是降低或升高基因表达水平,请简要说出三种相关研究方法及原理。 2. mRNA和蛋白质的降解是一个有序的过程,其中microRNA和泛素起了非常重要的作用,请简述microRNA的概念、产生过程、作用机制,或者泛素的概念和蛋白质泛素化的过程。 3. 某实验需将1kb的cDNA片段插入某氨苄青霉素抗性的表达载体,在片段两边各有一个EcoRI位点,靠近5’端300bp的地方有一EcoRV位点,载体多克隆位点从5’依次为BamHI、HindIIII、EcoRI、EcoRV、XhoI位点,实验设计步骤如下: (1)用EcoRI处理载体,然后用碱性磷酸酶处理。 (2)用EcoRI处理片段,然后与步骤(1)中的载体混合,加入DNA连接酶,在适当的条件下使cDNA片段与载体连接。 (3)连接产物转化到大肠杆菌,并在含有氨苄青霉素的LB平板上生长,除此之外,还设了以下对照: 对照1:在含有抗生素的平板上涂布未被转化的大肠杆菌感受态细胞。 对照2:用未被酶切处理的载体转化大肠杆菌感受态细胞,并在含有抗生素的平板上生长。 对照3:用EcoRI处理的载体,不用碱性磷酸酶处理,不加cDNA片段,然后加连接酶做连接反应,并转化大肠杆菌感受态细胞,并在含有抗生素的平板上生长。 对照4:除了用碱性磷酸酶处理外,其他同对照3. 某学生做了三次试验,结果如表: 请回答下列问题: 问题1:四个对照组各有什么用? 问题2:为什么要用碱性磷酸酶处理? 问题3:哪次实验数据比较合理?为什么?其他次实验失败的原因是什么? 问题4:设计实验鉴定克隆是否正确? 武汉大学2014年攻读硕士研究生分子生物学也入学考试试题 一、名词翻译与解释(40分) Complementary DNA 补充DNA(cDNA),一种由逆转录酶逆转录mRNA所得到的DNA。 RNA splicing RNA剪接,指RNA前体在剪接体作用下切除内含子的过程。 Histone 组蛋白,一类与真核DNA结合组成核小体的蛋白质。 Gel-filtration chromatography 凝胶过滤层析柱法,一种在层析柱中以凝胶为过滤介质的用于分离纯化蛋白质的方法。 Gene 基因,指编码产生具有活性的蛋白质或RNA所需要的全部核酸序列。 Enhancesome 增强体,指转录因子结合到增强子上形成的复合物。 SnRNP 核小核糖核蛋白,由snRNA与多种蛋白质组成的用于形式RNA剪接的复合蛋白。 Kozak sequence 科扎克序列,指线‘端帽后的一段可帮助核糖体识别起始密码并协助翻译起始的核苷酸序列。 Operon 操纵子,存在于原核生物细胞中有多个功能相关基因组成转录单位。 10. Transcription termination 转录终止,指RNA聚合酶遇上终止序列后结束转录的过程。 二、简答题(50分) 1、简述端粒酶在DNA复制中的功能及其生物学意义 2、从分子结构角度解释为什么DNA比RNA更为广泛地作为遗传信息的承载者? 3、简述中介蛋白复合物如何在转录激活中发挥作用? 4、如下图所示,从大肠杆菌中通过质粒提取试剂盒提取的质粒在溴乙锭-琼脂糖凝胶电泳上显示为三条带。请问这三条带各代表哪三种拓扑学结构? 5、蛋白质合成过程中需要哪些组分?每一组份在翻译过程中起的作用? 三、论述题(60分) 1、真核生物中RNA聚合酶II的C端结构域(CTD)在转录调控中发挥了重要作用。请描述CTD的结构特征,并阐述CTD在转录的各阶段以及RNA加工过程中如何发挥其调控作用? 2、分别从分子的产生与生物学功能和作用角度阐述siRNA和miRNA的异同。 3、已知蛋白质A可以影响蛋白质B的蛋白表达水平。请阐述蛋白质A可能在哪些分子层面调控蛋白质B水平?请设计实验证明你的推测。 武汉大学2015年攻读硕士研究生分子生物学也入学考试试题 一、名解 Exon 外显子,真核生物基因中参与最终表达产物编码的序列。 Promoter 启动子,基因中用于起始基因转录的调控序列。 Proteomics 蛋白质组学,一门在蛋白质组水平上研究蛋白质的结构功能、表达、修饰、互作等,以进一步深入了解基因功能的学科。 Frame-shift mutation 移码突变,指由于碱基插入或缺失造成的DNA序列发生移位改变,从而导致蛋白质氨基酸序列发生改变的一种基因突变。 Wobble hypothesis 摆动假说,一个由沃森提出的用于解释密码子简并性的学说,只要内容是密码子的头两个碱基与相应反密码子的第2个和第3个碱基互补配对,而密码子的第3个碱基配对专一性相对较差。 Single-strand binding protein 单链结合蛋白,一种在解旋酶解开双链后结合于DNA单链上用于维持单链稳定性的蛋白质。 Tandem affinity purification 串联亲和纯化技术,一种能子在生理条件下研究蛋白质相互作用、揭示蛋白质复合体相互作用网络的技术。 Chromatin remodeling 染色质重塑,指在复制、表达、重组等过程中染色质上DNA与组蛋白相对位置改变以增加DNA的可接近性的过程。 SNP 单核苷酸多态性,指基因组上由于单个碱基发生变异而引起的DNA序列产生多样性的现象。 Alternative splicing 选择性剪接,指细胞根据机体生长发育的需要通过不同的剪接发生使一种基因产生多种mRNA的过程。 二、简答 1.真核蛋白质磷酸化主要发生在哪三种氨基酸上,催化蛋白质磷酸化和去磷酸化的酶是什么?举例证明蛋白质磷酸化对功能的影响。 2.三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 3.RNAi及其作用机制 4.简述遗传密码的特点 5.什么是表观遗传学,为什么研究与组蛋白乙酰化修饰相关的酶是表观遗传学领域的热点? 三,论述 1.DNA双螺旋结构(主链,碱基配对,大沟小沟,结构参数等方面) 2.mRNA在原核和真核生物中的区别(基本结构,作用形式,功能特点等) 3. Northern Bolt Western Bolt? 2016(C卷)部分 名词 Northern blot RNase H 甲基转移酶 移码突变 去泛素化修饰 简答 什么是RNA编辑,简述其机制 要研究一种特定mRNA在细胞水平的表达情况,请设计实验 论述 DNA在复制中复合保持其准确性和完整性 要研究一个真核细胞内能与蛋白质A结合的mRNA,设计实验 已知蛋白质翻译后修饰有磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化、糖基化等,请举3例说明其修饰的主要氨基酸种类以及可能带来的功能或作用的生物学过程。 1 2 3 Marker Plasmid

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